Como instrumento analítico de uso común en campos como la biología, productos farmacéuticos, alimentos y productos químicos, el uso correcto y el mantenimiento diario de una cromatografía líquida afectan directamente la precisión de los resultados de las pruebas y la vida útil del instrumento. Para ayudar a los usuarios a operar y mantener el equipo de manera más efectiva, hemos recopilado doce puntos clave para el uso diario de la cromatografía líquida para su referencia.
1. Si el instrumento no se utilizará durante un período prolongado, se recomienda retirar la columna cromatográfica y sellarla con tapones. Evite almacenar columnas en agua pura; Se recomiendan disolventes orgánicos para evitar el crecimiento microbiano.
2. Después de cada análisis de muestra, limpie rápidamente el inyector con un solvente que disuelva la muestra para evitar la acumulación de residuos.
3. Las fases móviles deben ser de grado HPLC y deben filtrarse antes de su uso para eliminar partículas y otras impurezas.
4. Después de la filtración, la fase móvil debe desgasificarse mediante sonicación y dejarse que vuelva a temperatura ambiente antes de su uso.
5. Evite el uso de acetonitrilo puro como fase móvil, ya que puede provocar que la válvula de retención se atasque e impedir que la bomba extraiga líquido correctamente.
6. Después de cada uso de un tampón o una fase móvil que contenga sal, lave la columna con una solución de metanol/agua al 10 % durante 30 minutos para garantizar la eliminación completa de los residuos iónicos y luego lave con metanol puro durante otros 30 minutos. No enjuague con agua pura, ya que esto puede causar que el empaque colapse y dañe la columna. Antes de usarlo al día siguiente, equilibre con la misma proporción de agua y metanol durante 20 minutos.
7. Las columnas C18 no deben usarse para muestras que contengan proteínas, sangre u otras muestras biológicas, ya que esto puede reducir la eficiencia de la columna o causar obstrucción.
8. Si el sistema se bloquea y la presión aumenta demasiado, revise y limpie la precolumna, el filtro en línea en el mezclador, el filtro de tubería y la válvula de retención en ese orden. Los métodos de limpieza comunes incluyen enjuague con isopropanol, sonicación en isopropanol o limpieza con ácido nítrico diluido al 10 %.
9. Las burbujas en la fase móvil pueden provocar fluctuaciones de presión y una mala repetibilidad de los resultados. Se deben hacer esfuerzos para evitar la formación de burbujas durante la operación.
10. Cuando el tubo de entrada no puede extraer líquido normalmente, se puede utilizar la succión manual con una jeringa. Generalmente se requiere un paso de purga de fase móvil antes de comenzar la entrega.
11. Preste atención al rango de pH marcado en la columna. Nunca inyecte muestras fuertemente ácidas o fuertemente básicas, especialmente muestras básicas, ya que pueden dañar la fase estacionaria.
12. Al cambiar la fase móvil, se recomienda colocar primero el filtro de succión en un vaso y enjuagarlo mientras vibra, antes de transferirlo a la nueva fase móvil. Para reemplazar las fases móviles inmiscibles, se debe utilizar isopropanol como disolvente de transición para garantizar un cambio de sistema sin problemas.
