Determinación de 27 compuestos perfluorados (PFC) mediante LC-MS/MS

• analito: 27 compuestos perfluorados y 2 patrones internos
• Sistema: MS²Vertical 9100 LC-MSMS
• Columna: Supersil ODS2 (2,1 × 100 mm, 3 µm)
• Destacar: Un método LC-MS/MS sensible y confiable para la determinación simultánea de 27 compuestos perfluorados en una sola ejecución.

Los compuestos perfluorados (PFC) se utilizan ampliamente en las industrias química, textil y del cuero debido a su excelente estabilidad térmica y química, actividad superficial y propiedades hidrofóbicas/oleófobas. Sin embargo, los PFC son contaminantes orgánicos persistentes que pueden causar daño hepático crónico, inmunotoxicidad y alteración endocrina. Muchos países han restringido su uso. Este método, desarrollado de acuerdo con ISO 23702-1:2018 y CEN/TS 15968-2010, utiliza un sistema LC 3200 EClassical junto con un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo MS²Vertical 9100 para la determinación simultánea de 27 PFC, lo que ofrece alta sensibilidad y excelente repetibilidad.

Estándares

Estándares PFC : 27 estándares de compuestos perfluorados individuales (pureza ≥98%) y estándares internos marcados isotópicamente (p. ej., MPFOA, MPFOS).

reactivos

Metanol: grado HPLC; Agua Desionizada, ≥18,2 MΩ·cm.

Otros materiales

Tubos de centrífuga de polipropileno (50 mL), filtros de jeringa (0,22 μm), etc.

Preparación de solución estándar

Solución madre mixta : Prepare una solución estándar mixta que contenga los 27 PFC en concentraciones adecuadas en metanol.

Solución estándar interna: Prepare una solución de estándar interno mixto (p. ej., MPFOA, MPFOS) a una concentración de 200 ng/ml.

Estándares de calibración: Diluir la solución madre mixta con metanol para obtener concentraciones de 0,5, 1, 2, 5, 10 y 20 ng/ml. Agregue una cantidad fija de estándar interno a cada nivel de calibración.

La preparación de muestras sigue la norma ISO 23702-2018.:

• Cortar la muestra en trozos pequeños (aproximadamente 2 mm × 2 mm) y homogeneizar.
• Pese con precisión aproximadamente 1 g (a 0,01 g) de la muestra preparada en un tubo de centrífuga de polipropileno de 50 ml.
• Añadir 10 ml de metanol y 100 l de solución de estándar interno.
• Sonicar a 60 ± 2°C durante 60 ± 5 min.
• Centrifugar a 4000 r/min durante 5 min.

Filtrar el sobrenadante a través de un filtro de jeringa de 0,22 μm. El filtrado está listo para el análisis LC-MS/MS.

Sistema LC

EClassical Sistema HPLC de 3200 L equipado con una bomba binaria, un muestreador automático y un horno de columna.

espectrómetro de masas

Espectrómetro de masas de triple cuadrupolo MS²Vertical 9100 con fuente de ionización por electropulverización (ESI).

• Columna: Supersil ODS2 (2,1 × 100 mm, 3 µm).
• Fase móvil: R: Agua; B: Metanol, en gradiente (Tabla 1)
• Caudal: 0,3 ml/min
• Temperatura de la columna.: 40°C
• Volumen de inyección: 10 µL

Tabla 1. Programa de gradiente

• Modo de ionización: ESI negativo (ESI-)
• Voltaje de pulverización: -4500 voltios
• Temperatura de la fuente de iones.: 300°C
• Gas de cortina: 20 psi (N₂)
• gas nebulizador: 20 psi (N₂)
• Parámetros de MRM: Para cada compuesto, se optimizaron el ion precursor, los iones producto, la energía de colisión, etc.

Cromatogramas típicos

En las condiciones optimizadas, los 27 PFC y los 2 estándares internos estaban bien separados y detectados en una sola ejecución. La Figura 1 muestra los cromatogramas MRM superpuestos de los 29 compuestos a 2 ng/ml, y la Figura 2 muestra cromatogramas MRM individuales. Todos los picos son simétricos con suficientes puntos de datos para una cuantificación precisa.

Figura 1. Cromatogramas superpuestos de extracción MRM para 29 compuestos a 2 ng/ml

Figura 2. Cromatogramas superpuestos de MRM de los 29 compuestos a 2 ng/ml

Linealidad

Las curvas de calibración se construyeron trazando las proporciones de área de los picos (analito/IS) frente a concentraciones en el rango de 0,5 a 20 ng/ml. Los 27 compuestos exhibieron una linealidad excelente con coeficientes de correlación (R) > 0,997.

Sensibilidad y repetibilidad

Los límites de detección del método están muy por debajo de los requisitos de las normas de referencia (CEN/TS 15968-2010 e ISO 23702-1:2018). La alta sensibilidad y repetibilidad hacen que este método sea adecuado para el seguimiento rutinario de PFC en diversas matrices.

El método LC-MS/MS desarrollado utilizando el sistema EClassical 3200 y MS²Vertical 9100 permite una determinación rápida, sensible y confiable de 27 compuestos perfluorados en un solo análisis. Proporciona una herramienta de detección de alto rendimiento con excelente linealidad y repetibilidad, que cumple con los requisitos reglamentarios.